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蓍草化学成分研究

来源:世旅网
2015年4月l第40卷第7期 恩 蒌 蠡焘 Vo1.40,No.7 l April,2015 蓍草化学成分研究 陈筱清,王萌,张欣,郭未蔚,吴霞 (首都医科大学中医药学院中医络病研究北京市重点实验室,北京100069) [摘要] 采用硅胶、凝胶和半制备液相等色谱方法对蓍草Achillea alpina L.地上部分进行化学成分研究。根据理化性质和波 谱学方法鉴定化合物的结构分别为墙草碱(1),8,9-dehydmpellitorine(2),(E,E)一2,4-undecadien一8,10一diynoic acid isobutylam. ide(3),(E,E)一2,4-tetradecadien一8,10一diynoic acid isobutylamide(4),sintenin(5),4 ,5,7,8一四甲氧基黄酮(6),猫眼草黄素(7), 芒柄花素(8),aurantiamide(9),金色酰胺醇酯(10),artemetin(11),半齿泽兰素(12)。化合物1—5为首次从该植物中分离得 到,化合物6—10为首次从该属中分离得到。 [关键词] 蓍属;蓍草;化学成分;生物碱 Study on chemical constituents of Achillea alpina CHEN Xiao—qing,WANG Meng,ZHANG Xin,GUO Wei—wei,WU Xia (Beijing Key Lab of Traditional Chinese Medicine Collateral Disease Theory Research,School of Traditional Chinese Medicine, Capital Medical University,Bering 100069,China) [Abstract]Twelve compounds were isolated from the aerial pans of Achillea a ̄ina by column chromatographies on silica gel,Seph・ adex LH一20,and semi—preparative HPLC.The structures were elucidated on the basis of spectral analysis.The compounds were identi— lfed as pellitorine(1),8,9-dehydropellitorine(2),(E,E)一2,4一undecadien一8,10一diynoic acid isobutylamide(3),(E,E)一2,4-tetradec— adien一8,10一diynoic acid isobutylamide(4),sintenin(5),4 ,5,7,8-tetramethoxylfavone(6),chrysoplenetin(7),formononetin(8), aurantiamide(9),asperglaueide(10),artemetin(11),and eupatorin(12).compounds 1-5 were isolated from this plant for the first time,and compounds 6-10 were isolated from the genus Achillea for the first time. [Key words] Achillea;Achillea alpina;chemical constituents;alkaloids doi:1O.4268/cjcmm20150722 蓍草为菊科植物蓍Achillea alpina L.的干燥地 上部分,收载于《中国药典))2010年版一部,在我国 贵州、江西、内蒙古、东北等地均有作为民间药物应 用的记载,具有解毒利湿,活血止痛的功效,用于乳 蛾咽痛,泄泻痢疾,肠痈腹痛,热淋涩痛,湿热带下, 生物碱、1个吉玛烷型倍半萜内酯、5个黄酮和2个 氨基酸衍生物,化合物1—5为首次从该植物中分离 得到,化合物6—10为首次从该属中分离得到。 1材料 BRUKER AVANCE II核磁共振仪,TMS为内标 蛇虫咬伤。蓍草还具有明显的抗炎杀菌、抗氧化、降 血压、保肝治肝等作用,但蓍草的化学成分研究非常 少 。 。为了阐明该植物的化学成分,本实验对蓍草 物;Agilent 6490型ESI质谱仪;岛津CBM-20A半制 备高压液相色谱仪;半制备色谱柱(Agilent Eclipse XDB—C18 Semi—Prep 5 m,9.4 mm×250 mm),超 的90%乙醇提取物的氯仿萃取部位进行了系统研 究,从中分离鉴定了l2个化合物,包括4个酰胺类 [收稿日期]2014—11-25 [通信作者] 纯水仪(Millipore-Q),1/10万电子天平(赛多利 斯),KQ5200DU型数控超声波清洗器,旋转蒸发仪 吴霞,教授,研究方向为中药化学,Tel:(010)83911671,E—mail:wuxia6710@163.conl [作者简介] 陈筱清,讲师,研究方向为中药化学,Tel:(010)83911633,E-mail:exqcpu@gmail.com ・1330・ 陈筱清等:蓍草化学成分研究 (EYELA 1000)。薄层色谱和柱色谱用硅胶(青岛 海洋化工厂);Sephadex LH.20(法玛西亚);石油醚、 7.0 Hz,H一3 ,4 ),0.88(3H,t,J=10.0 Hz,H一10); C.NMR(CDC1 ,125 MHz)6:166.4(C一1),121.7 乙酸乙酯、氯仿、丙酮、正丁醇等试剂为分析纯,甲 醇、乙腈为色谱纯。 蓍草药材2013年1 1月采自河北张家口,经中 (C-2),143.1(C一3),128.2(C-4),141.3(C-5), 33.90(C一6),31.3(C-7),28.4(C一8),22.4(C一9), 13.9(C一10),46.9(C-1 ),28.6(C-2 ),20.1(C-3 , 国药科大学中药分析教研室王强教授鉴定为菊科植 物蓍A.alpina的干燥地上部分。标本(No. 20131 107)保存于首都医科大学中药化学教研室。 4 )。以上数据与文献[4]对照,鉴定化合物为墙 草碱。 化合物2 白色晶体(石油醚.丙酮);ESI.MS 2提取与分离 蓍草干燥地上部分3.0 kg,粉碎后用6倍量 90%乙醇回流提取3次,每次1.5 h,合并提取液,浓 缩后得浸膏260 g。将浸膏用适量水分散,依次用石 油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取。合并萃取液, 回收溶剂至干得石油醚萃取物10 g,氯仿萃取物55 g,乙酸乙酯萃取物30 g,正丁醇萃取物60 g。取氯 仿部分50 g,经硅胶柱色谱分离,以石油醚.乙酸乙 酯梯度洗脱,经TLC检测合并后得6个组分(Frl~ Fr6),Fr2组分(2.5 g),再次用石油醚一丙酮梯度洗 脱,合并后得5个组分(Fr2.1~Fr2.5),Fr2.1组分 (335 mg)以甲醇-水(65:35,流速2.5 mL・min ) 为流动相,经半制备型HPLC分离得化合物1(25 mg,tR=11.5 min)和3(12 mg,tR=14.7 min),Fr2— 2组分(185 mg)以甲醇一水(55:45,流速2.5 mL・ )为流动相,经半制备型HPLC分离得化合物 2(15 mg,tR=15.5 min),5(30 mg,tR=17.8 rain) 和12(18 mg,tR=21.5 min),Fr2—3组分中经Sepha- dex LH.20柱色谱甲醇洗脱得化合物6(15 mg), Fr2—4组分(135 mg)以乙腈一水(33:67,流速2.5 mL ・min )为流动相,经半制备型HPLC分离得化合 物9(25 mg,tR=17.5 min)和10(12 mg,tR=19.6 min);Fr2-5组分(128 mg)以甲醇一水(50:50,流速 2.5 mL・min )为流动相,经半制备型HPLC分离 得化合物4(8 mg,tR=22.5 min),7(12 mg,tR: 25.6 min)和8(27 mg,tR=27.6 min)。 3结构鉴定 化合物1 白色晶体(石油醚 丙酮);ESI.MS m/z 224[M+H] ; H—NMR(CDC1 3,500 MHz)8: 7.19(1H,dd,J:10.0,15.0 Hz,H-3),6.03~6.15 (2H,ITI,H4,5),5.78(1H,br s,一NH),5.74(1H,d, J=15.0 Hz,H-2),5.57(1H,br s,一NH),3.16(2H, t,J=6.0 Hz,H一1 ),2.14(2H,ITI,H-6),1.80(1H, in,H一2 ),1.34(6H,In,H-7,8,9),0.92(6H,d,J= m/z 222[M+H] ;1 H—NMR(CDC13,500 MHz)6‘: 7.19(1H,dd,J=10.0,15.0 Hz,H一3),6.15(1H,dd, J=10.0,15.0 Hz,H-4),6.07(1 H,dt,J=15.0,6.0 Hz,H一5),5.75(d,J=15.0 Hz,H-2),5.46(1H,dqt, J=11.0,7.0,1.0 Hz,H-9),5.36(1 H,dtq,J=11.0, 7.0,1.0 Hz,H一8),3.16(2H,dd,J=6.0,7.0 Hz,H一 2 ),2.19(4H,in,H-6,7),1.80(1H,sept,J=7.0 Hz,H一3 ),1.60(3H,br d,J=7.0 Hz,H一10),0.92 (6H,d,J=7.0 Hz,H4 ,5 )。以上数据与文献[5] 对照,鉴定化合物为(E,E,z)-2,4,8-deeatrienoie acid isobutylamide(8,9一dehydropellit0rine)。 化合物3淡黄色油状物(甲醇)。ESI.MS m/z 230[M+H] 。 H—NMR(CDC13,500 MHz)6:7.19 (1H,dd,J=l1.0,15.0 Hz,H一3),6.19(1H,dd,J= 11.0,15.0 Hz,H_4),6.05(dt,J:15.0,7.0 Hz,H一 5),5.79(d,J=15.0 Hz,H-2),5.46(br t,_,=5.0 Hz,-NH),3.17(2H,dd,J:6.0,7.0 Hz,H一2 ),2.35 (4H,m,H-6,7),1.98(1 H,s,H一11),1.80(1 H, sept.,J=7.0 Hz,H-3 ),0.93(6H,d,J=7.0 Hz,H- 4 ,5 )。以上数据与文献[6]对照,鉴定化合物为 (E,E)-2,4一undecadien-8,10-diynoic acid isobutylam- ide。 化合物4淡黄色油状物(甲醇);ESI—MS m/z 272[M+H] ; H-NMR(CDC13,500 MHz)6:7.19 (1H,dd,J=10.0,15.0 Hz,H一3),6.19(1H,dd,J= 10.0,15.0 Hz,H4),6.07(1H,dt,J=15.0,7.0,H一 5),5.79(1H,d,J=15.0,H-2),3.17(2H,t,J=7.0, H-2 ),2.37(4H,In,H-6,7),2.23(2H,t,J:7.0,H- 12),1.80(1H,sept.,J=7.0,H一3 ),1.55(2H,tq, J=7.0,H-13),0.99(3H,t,J=7.0,H-14),0.92 (6H,d,J=7.0,H4 ,5 )。以上数据与文献[5]对 照,鉴定化合物为(E,E)-2,4-tetradecadien一8,10一 diynoic acid isobutylamide. 化合物5 白色片状结晶(甲醇);ESI.MS m/z ・1 331・ 2015年4月l第4O卷第7期 宝 凰 点 蠡盎 Vo1.40,No.7 l April,2015 373[M+Na] ; H.NMR(CDCI3,500 MHz)6:5.23 (1H,dd,J=4.5,1.0 Hz,H-1),5.21(1 H,dd,J= 4.5,1.5 Hz,H-3),5.16(1 H,dd,J=10.5,4.5Hz,H- 9),4.76(1H,d,J:10.OHz,H-6),4.72(1H,d,J= 10.0Hz,H-5),2.71(1 H,in,H一1 1),2.55(1 H,in,H一 2 ),2.30(1H,in,H一2口),1.86(2H,ITI,H一8a,/3), 2.03(3H,s,一OCOCH3),2.10(3H,s,一OCOCH3); ”C-NMR(CDCI ,125 MHz)6:127.9(C-1),31.2(C一 2),78.5(C-3),137.3(C-4),125.6(C一5),79.3(C一 6),45.8(C一7),31.4(C一8),80.6(C-9),136.4(C一 10),40.4(C一11),178.6(C一12),10.9(C-13),11.6 (C一14),12.3(C一15),169.8(C—l ),20.9(C-2 ), 169.7(C.1”),20.8(C-2”)。以上数据与文献[7]对 照,鉴定化合物为sintenin。 。 化合物6黄色针晶(甲醇);ESI.MS m/z 343 [M+H] ; H—NMR(CDC13,500 MHz)6:7.95(2H, d,J=8.5 Hz,H.2 ,6 ),7.06(2H,d,J=9.0 Hz,H- 3 ,5 ),6.60(1H,s,H-3),6.43(1H,s,H-6),4.03 (3H,s,一OCH ),3.95(3H,s,-OCH3),3.92(3H,s,・ OCH3),3.87(3H,s,-OCH3);”C—NMR(CD3OD,125 MHz)6:162.3(C一2),106.9(C-3),177.9(C_4), 152.0(C-5),92.6(C一6),156.1(C-7),130.8(C一 8),156.3(C-9),109.1(C一10),123.8(C一1 ),127.7 (C.2 ,6 ),114.4(C一3 ,5 ),160.6(C4 ),61.5(8一 OCH3),56.6(5-OCH3),56.2(7-OCH3),55.2(4 ・ OCH )。以上数据与文献[8]对照,鉴定化合物为 4 ,5,7,8.四甲氧基黄酮。 化合物7黄色针晶(甲醇);ESI-MS m/z 375 [M+H] ;。H—NMR(DMSO-d6,500 MHz)6:12.63 (1H,s,5一OH),9.94(1H,s,4'-OH),7.68(1H,d, J=1.5 Hz,H一2 ),7.63(1H,dd,J:1.5,8.5 Hz,H一 6 ),6.97(1H,d,J=8.5 Hz,H-5 ),6.92(1 H,s,H- 8),3.93(3H,s,7-OCH3),3.88(3H,s,3 -OCH3), 3.82(3H,s,3一OCH3),3.74(3H,s,6-OCH3);”C- NMR(DMSO—d ,125 MHz)6:178.2(C_4),158.6(C一 7),155.8(C一2),151.7(C一5),151.6(C-9),149.9 (C.4 ),147.5(C一3 ),137.7(C-3),131.6(C一6), 122.3(C-6 ),120.7(C-1 ),115.6(C一5 ),112.1(C一 2 ),105.6(C-10),91.5(C一8),60.0,59.7,56.5, 55.8(each 3H,s,OCH )。以上数据与文献[9]对 照,鉴定化合物为猫眼草黄素。 化合物8 白色粉末(甲醇);ESI-MS m/z 269 .1 332・ [M+H] ; H—NMR(DMSO—d6,500 MHz)6:10.83 (1 H,s,7-OH),8.33(1 H,s,H一2),7.95(1H,d,J= 8.5 Hz,H-5),7.49(2H,d,J=8.5 Hz,H一2 ,6 ), 6.98(2H,d,J=8.5 Hz,H-3 ,5 ),6.93(1H,dd,J= 8.5,2.0 Hz,H一6),6.86(1H,d,J=2.0 Hz,H-8), 3.77(3H,s,-OCH3); C—NMR(DMSO-d6,125 MHz) 6:153.4(C一2),123.4(C-3),174.7(C-4),127.0(C一 5),115.6(C-6),161.7(C-7),103.4(C-8),159,2(C一 9),118.3(C一10),124.5(C一1 ),130.9(C-2 ,6 ), ll4.3(C--3,5 ),160.7(C4 ),55.4(一OCH,)。以上数 据与文献[10]对照,鉴定化合物为芒柄花素。 化合物9 白色粉末(甲醇);ESI.MS m/z 425 [M+Na] ; H—NMR(CDC13,500 MHz)6:7.71(2H, dd,J=7.5,1.0 Hz,H-3 ,7 ),7.52(1H,t,J=7.5 Hz,H-5 ),7.42(2H,t,J=7.5 Hz,H_4 ,6 ),7.23 (5H,in,H-5,6,7,8,9),7.15(3H,t,J=7.5 Hz,H一 5 ,6”,7”),7.07(2H,d,J=7.5 Hz,H4”,8”),6.73 (1H,d,J=7.5 Hz,/3一NH),5.77(1H,d,J=8.0 Hz, oL—NH),4.75(1 H,q,J=8.0 Hz,H-2),4.09(1H,m, H一1”),3.43(2H,m,H一9”),3.23(1H,dd,J=13.5, 6.0 Hz,H.3a),3.07(1H,dd,J=13.5,8.5 Hz,H. 3b),2.76(1H,dd,‘,=14.0,7.5 Hz,H-2”a),2.69 (1 H,dd,J=14.0,7.0 Hz,H一2”b),1.91(1 H,br s,- OH);”C-NMR(CDCI3,125 MHz)6:170.1(C-1), 55.2(C-2),38.6(C一3),136.8(C-4),128.6(C一5, 9),129.3(C一6,8),127.2(C-7),167.2(C-1’), 133.7(C-2 ),128.3(C一3 ,7 ),127.0(C-4 ,6 ), 132.0(C-5 ),49.5(C-1 ),37.5(C一2 ),136.6(C一 3”),128.8(C4”,8 ),129.1(C一5 ,7 ),126.5(C一 6”),64.6(C一9 )。以上数据与文献[11]对照,鉴定 化合物为aurantiamide。 化合物1O 白色针晶(石油醚.丙酮);ESI.MS m/ 467.1 J M+Na l ; H.NMR(cDCl ,500 MHz) :7.00~8.00(15H,m,A卜H),6.82(1H,d,.,=6.0 Hz,-NH),6.06(1H,br s,一NH),4.77(1H,m,H-2 ), 4.33(1H,m,H一2),3.91(1H,dd,.,=11.3,4.9 Hz, H一1a),3.81(1H,dd,.,=l1.3,4.2 Hz,H-1b),3.21 (1H,dd,.,=13.5,6.0 Hz,H一3 a),3.05(1H,dd,‘,= 13.5,8.4 Hz,H一3 b),2.73(2H,dd,‘,=7.1,3.4 Hz,H-3),2.O3(3H,s,-CH3); C-NMR(CDCl3,125 MHz) :64.5(C-1),49.4(C一2),37.4(C一3),136.4 (C4),l29.1(C-5,9),l28.5(CIl5,8),l27.1(C・ 陈筱清等:蓍草化学成分研究 7),170.0(C-1 ),54.9(C一2 ),38.4(C-3 ),136.5 (C-4 ),129.3(C-5 ,9 ),128.7(C-6 ,8 ),126.7(C一 7 ),167.1(C一1”),133.6(C-2”),127.0(C一3”,7”), 128.5(C_4”,6”),131.9(C-5”),170.8(一COOCH ), 20.8(.COOCH,)。以上数据与文献[12]对照,鉴定 化合物为金色酰胺醇酯(asperglaucide)。 化合物1l 黄色粉末状(甲醇);ESI.MS m/z 389[M+H] ; H.NMR(CDCI ,500 MHz) :7.74 (1 H,dd,J=8.5,2.0 Hz,H-6 ),7.65(1H,d,J=2.0 Hz,H-2 ),6.98(1H,d,J=8.5 Hz,H-5 ),6.47(1H, s,H-8),3.97(3H,s,一OCH3),3.95(3H,s,一OCH3), 3.95(3H,s,一OCH3),3.90(3H,s,-OCH3),3.84 (3H,s,一OCH3);”C-NMR(CDC13,125 MHz)6:155.8 (C一2),138.9(C一3),178.8(C-4),152.2(C一5), 132.3(C-6),158.8(C-7),90.4(C一8),152.8(C一9), 105.7(C一10),123.8(C・1 ),110.2(C一2 ),148.9(C- 3 ),151.5(C-4 ),111.4(C一5 ),122.2(C一6 ),60.8 (3-OCH3),60.0(6一OCH3),56.2(7,4'-OCH3),56.1 (3 一OCH。)。以上数据与文献[13]对照,鉴定化合 物为artemetin。 化合物l2黄色粉末状(甲醇);ESI—MS m/z 369[M+H] ; H—NMR(CDCI3,500 MHz)6:13.09 (1H,s,5一OH),7.54(1H,dd,J=8.5,2.0 Hz,H- 6 ),7.35(1H,d,J=2.0 Hz,H一2 ),6.99(1H,d, J=8.5 Hz,H-5 ),6.61(1H,s,H-8),6.52(1H,s,H一 3),4.06(3H,s,一OCH3),3.97(3H,s,一OCH3),3.95 (3H,s,一OCH3);”C-NMR(CDC13,125 MHz)6:164.1 (C-2),104.2(C-3),183.1(C_4),153.2(C-5), 130.3(C-6),155.1(C-7),93.5(C一8),152.4(C-9), 108.8(C一10),123.8(C一1 ),111.2(C-2 ),149.3(C一 3 ),152.2(C-4 ),111.2(C-5 ),120.2(C-6 ), 56.O,56.0,60.8(一OCH )。以上数据与文献[14]对 照,鉴定化合物为半齿泽兰素。 [参考文献] [1]中国药典.一部[s].2010:350. 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