时珍国医国药２０１０年第２ｌ卷第５期ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ ＭＥＤＩＣＩＮＥ ＡＮＤ ＭＡＴＥＲＩＡ ＭＥＤＩＣＡ ＲＥＳＥＡＲＣＨ ２０１０ ＶＯＬ・２１ ＮＯ・５ （２）：１１５． Ｈ一３，５），７．１０（ｄ，‘，：８．４ Ｈｚ，Ｈ～２，６）；”Ｃ—ＮＭＲ ８１２６．６（Ｃ一 １），１３１．６（Ｃ一２，６），８１１６．５（Ｃ一３，５），１５７．９（Ｃ一４），４１．２（Ｃ一 ［４ 卫剑文，钟肖芬，彭立胜，等．平颏海蛇ＣＲＶＰ基因全长ｃＤＮＡ片段 ［５ 的克隆和序列分析［Ｊ］中山大学学报，２００１，４０（４）：５． 饶颖竹，陈蓉，肖桂元，等．海蛇乙醇浸出物对小鼠抗疲劳作用的 ７），１７４．８（ｃ～８），５２．７（Ｃ一９）。以上数据与文献［８ 报道一致， 确定为对一羟基苯乙酸甲酯（ｍｅｔｈｙｌ Ｐ—ｈｙｄｍｘｙｂｅｎｚｅｎｅａｃｅｔａｔｅ）。 参考文献： ［１］张黎明，陈志龙．海蛇的药用价值［Ｊｊ．中医药学报，２００２，３０（５）： ２５． 实验研究［Ｊ］．蛇志，２００３，１５（４）：９． ［６ 汤华，程萍，林厚文，等．总合草苔虫的化学成分研究［Ｊ］．中药 材，２００７．３０（６）：６５５． ［７］ 史［８］ 吴辑，张芳，马鸿雁，等．千里光化学成分研究［Ｊ］．中国中药杂 磊，等．麻叶千里光抗菌化学成分的研究（Ｉ） ［２］ 潘汉杰，周少雄．海蛇乙醇浸出物对小鼠免疫系统的影响 Ｊ Ｊ．蛇 志，２００１，ｌ３（２）：１． 志，２００７，３２（１５）：１６００． 斌，吴立军，张［３］ 任海霞，肖 诚， Ｌ丽，等．海蛇乙醇提取物对胶原诱导关节炎大 鼠滑膜血管生产的抑制作用：Ｊ］．中国中医基础医学杂志，２００７，１３ ［Ｊ］．沈阳药科大学学报，２００４，２１（５）：３４１． 止消通脉宁颗粒对糖尿病肾病大鼠的治疗作用研究 汪家春 ，王 征 ，储智勇 ，张 术 ，栾 洁 ，沈（１．中国人民解放军海军医学研究所，上海越 ２０００９２） ２００４３３； ２．．上海清风阁医药科技有限公司，上海摘要：目的研究止消通脉宁颗粒对糖尿病肾病大鼠的治疗作用。方法采用高糖高脂饲料刺激加链脲佐菌素诱导糖尿 病肾病大鼠模型，评价止消通脉宁颗粒对糖尿病肾痛大鼠血糖、尿素氮、肌酐及肾脏结构和功能的影响。结果与模型组 相比，止消通脉宁颗粒能剂量依赖性地显著降低血糖、尿素氮、肌酐水平，减轻肾脏组织的结构和功能病变。结论止消 通脉宁颗粒能改善大鼠糖尿病症状，较好地保护肾脏结构和功能。 关键词：止消通脉宁颗粒； 大鼠； 实验性糖尿病； 肾脏病变 中图分类号：Ｒ２８５．５ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１００８－０８０５（２０１０）０５—１１２８－０２ 糖尿病肾病（Ｄｉａｂｅｔｉｃ Ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ，ＤＮ）属糖尿病（ｄｉａｂｅｔｅｓ雄各半，作为正常对照组，给予普通饲料，其余大鼠全部给予高 ｍｅｉｌｉｔｕｓ，ＤＭ）微血管病变，是糖尿病临床常见的严重并发症之：糖、高脂、高胆固醇饲料（含蔗糖１０％，猪油１０％，胆固醇５％）， 随着糖尿病发病率的逐年上升，ＤＮ已成为终末期肾功能衰竭的首参照郭啸华等 方法，饲养１个月后，随机抽取１５只大鼠，眼眶 位病因。因此，防治ＤＮ的发生发展成为目前研究的热点和重点取血，分离血清，放免检测血清胰岛素含量。同时取１０只正常组 之一 。止消通脉宁颗粒是在总结北京中医药大学吕仁和教授治作为对照。根据检测胰岛素结果，判断高糖、高脂、高胆固醇饮食 疗糖尿病肾病三十多年临床经验方剂的基础上，改进制剂工艺而的大鼠是否已经产生胰岛素抵抗。对产生胰岛素抵抗的大鼠腹 得 ］。处方主要由黄芪、大黄、瓦楞子等组成，具有益气培元、补腔注射３０ ｒａｇ／ｋｇ链脲佐菌素，１周后测血糖，将血糖低于１１．２ 肾健脾、化瘀散结、泄浊解毒的功效，临床用于糖尿病肾病、高血压肾损害、慢性肾炎、肾囊肿等各种原因引起的肾功能不全和脾肾虚损兼血瘀、湿浊邪毒内停者。临床应用证明，止消通脉宁具有延缓糖尿病肾病病人肾功能衰竭和改善病人生存质量的功效。。，且未发现与药物相关的副反应。在此基础上，将其开发成符合国家新药标准的中成药具有重要的经济和社会价值 ｍｍｏｌ／Ｌ的大鼠弃去。 ２．２动物的给药及饲养高血糖大鼠随机分为５组：模型组、卡 托普利组（８ ｍ ｋｇ）、止消通脉宁颗粒高剂量组（２８．８ ｇ／ ）、止 消通脉宁颗粒中剂量组（１４．４ ｋｇ）、止消通脉宁颗粒低剂量组 （７．２ ｇ／／ｋｇ），给药量为Ｉ．０ ｍｌ／ｌＯ０ ｇ大鼠体质量。每天均给药Ｉ 次，正常组和模型组大鼠每天给予等量的饮用水灌胃。连续用药 根据止消通脉宁颗粒的主治与功能，本研究观察其对链脲佐８周。４周后取模型组和正常组大鼠的尿液，进行尿液常规分析， 菌素诱导的糖尿病肾病大鼠的治疗作用，为其临床应用与开发提判断模型组肾功能是否受到损害，以进一步确认动物模型。 供药理学依据 ２．３指标测定一般观察：包括大鼠的活动、形态、精神状态，每 １ 材料与仪器 两周将大鼠用代谢笼饲养，测定２４ｈ饮水量、进食量、尿量、体质 Ｗｉｓｔａｒ大鼠，清洁级，动物合格证号：ＳＣＸＫ（沪）２００２—００１０ 量。生化指标测定：用血糖试纸与血糖仪测定大鼠血糖水平；各 止消通脉宁颗粒（１ ｇ浸膏粉相当于生药７．３７ ｇ，上海清风阁医药组大鼠在最后１次测定体质量、摄食量、饮水量、尿量和血糖后， 科技有限公司，批号２００５１０１１）；链脲佐菌素（ＵＳＡ，Ｓｉｇｍａ公司出立即以毛细管从眼球后静脉丛取血３ ｍｌ左右，常温下放置１ｈ， 品）；卡托普利（中美上海施贵宝制药有限公司，批号０６０３０３１）；４ 冰箱静置６ ｈ后，以２ ５００ ｒ／ｒａｉｎ离心１５ ｍｉｎ，分离血清，采用 二甲双胍（昆山培力药品有限公司，０６０２００４）；透射电镜（日立 自动生化分析仪检测血清尿素氮、血肌酐含量；检测各组大鼠最 Ｈ一６００犁） 后１次尿样尿微量白蛋白含量。肾脏病理学超微电镜检查：每组 ２方法 随机抽取３只大鼠，取大鼠左肾皮质部约０．２ ＣＩＴＩ×０．２ ｃｍ×０．２ ２．１ ＤＭ模型制备选取血糖在４．２～７．０ ｍｍｏＬ／Ｌ范围的清洁级Ｃｎｌ大小组织块，用２．５％戊二醛固定，在透射电镜上进行显微结 Ｗｉｓｔａｒ大鼠９０只，雌雄各半。从入选大鼠中随机挑选１Ｏ只，雌收稿日期：２００９－０４－２２； 修订日期：２００９－０７—２５ 卞句的病理学检查。 ２．４ 统计学处理所有数据以ｉ±ｓ表示，组间差异采用 ＳＰＳＳ１０．０软件进行分析。 ３结果 基金项目：上海市科委中药现代化专项基金（Ｎ０．０５ＤＺ１９７ｌ Ｏ］ 作者简介：汪家春（１９６９－），男（汉族），安徽太湖人，现任海军医学研究所 副研究员，学士学位，主要从事中药新药研究工作． 研究所副研究员，博士学位，主要从事心血管药理和中药新药研究工作 ・３．１ 止消通脉宁颗粒对糖尿病大鼠的体征的影响造模后的各 组大鼠体质量明显减轻，形体消瘦，精神萎靡，进食量和尿量显著 通讯作者简介：储智勇（１９６９一），男（汉族），江苏海安人，现任海军医学 增加，各治疗组大鼠在用药４周后精神好转，进食量、尿量也逐渐 减少。治疗组大鼠在用药８周后较模型组大鼠毛色明显好转，有 １１２８・ 时珍国医国药２０１０年第２１卷第５期 光泽，体重显著增加，自发活动较模型组显著多且自如。 在２５．０ ｍｍｏｌ／ｍｌ以上。在用药４周后，止消通脉宁颗粒组大鼠 ３．２止消通脉宁颗粒对大鼠血糖水平的影响各造模组大鼠在 血糖显著低于模型组，但高于正常对照组，卡托普利对血糖没有 造模后血糖迅速升高，一直持续至用药后第４周，之后一直维持 显著性影响。结果见表ｌ。 表ｌ 止消通脉宁颗粒对大鼠血糖的影响（ｉ±５） ｍｍｏｌ・Ｌ 与正常组比较， Ｐ＜０．Ｏｌ；与模型组比较， Ｐ＜０．０５，一Ｐ＜０．叭；ｎ＝１０ ３．３止消通脉宁颗粒对大鼠血清尿素氮、血清肌酐含量的影响 衰”等范畴。据统计，我国住院糖尿病病人ＤＮ的发生率达 模型组大鼠血尿素氮和血清肌酐水平非常显著高于正常对照组； ３３．６％：６ｉ。在其辨证和治疗方面，前人积累了丰富经验。古人多 止消通脉宁颗粒高剂量组大鼠血清尿素氮、血清肌酐含量显著低 从肾虚立论，而现代医家普遍重视其血瘀病机，常用补肾活血法、 于模型组；中剂量组与卡托普利组大鼠血清肌酐含量显著低于模 益气养阴、活血化瘀法、益气活血、健脾除湿法等治疗糖尿病肾 型组；低剂量组大鼠血清尿素氮、血清肌酐含量虽然比模型组低， 病，在改善症状、保护肾功能等方面，皆有一定疗效。 但没有显著差异。结果见表２。 表２止消通脉宁颗粒对大鼠血尿素氦、血肌酐含量的影响（ｉ± ） 与正常组比较， Ｐ＜０．０１；与模型组比较， Ｐ＜０．０５，一Ｐ＜０．０ｌ 图５中剂量组肾单位 图６高剂量组肾单位 ｎ＝１０ 超微结构图（７０００ ｘ） 超微结构图（７０００×） ３．４超微病理组织学检查正常组肾小球基底膜清晰，均匀一 现代药理研究认为，黄芪主要含有三萜皂苷、黄酮类、氨基 致，未见明显增宽，触突清晰，排列整齐。模型组细膜基质增生， 酸、多糖类等成分，研究表明其具有免疫调节、抗炎降压、镇静镇 截断增生，有些水管袢显著增生。基底膜均匀增厚，上皮轴突未 痛、保肝、护心、清除多种自由基等作用；瓦楞子是方中佐药，主要 见融合。。肾小管间质轻度增生，或不明显；部分小管上皮细胞糖 成分是碳酸钙，常用于治疗胃炎、消化性溃疡的复方制剂中；大黄 原颗粒增多，少数细胞空泡变性。止消通脉宁各剂量组及卡托普 是方中使药，主要含有蒽醌类、二苯乙烯苷类、色酮类、鞣质等成 利组都有类似的改变，但病变较轻。结果见图１～６。 分，具有泻下、抗菌、抗炎、镇痛、降压、降血脂等药理作用。 吕仁和教授对糖尿病肾病各期临床证候学进行研究，研制出 止消通脉宁等适合糖尿病肾病不同阶段的中药验方，取得了良好 疗效。长期毒性实验显示止消通脉宁颗粒在临床推荐剂量下使 用对人体是安全的 。本研究结果表明，止消通脉宁颗粒能明显 改善糖尿病肾病大鼠的一般状况，动物表现为皮毛光泽，体质量 稳定，“三多一少”症状明显减轻，显著降低血糖、尿素氮、肌酐等 水平，较好地保护肾脏组织的结构和功能，通过本次实验，初步证 明止消通脉宁对糖尿病肾病的治疗作用，其作用机制仍待进一步 位 深入研究。 ×） 参考文献： 『１］ 王霞糖尿病肾病的中西医治疗进展［Ｊ］时珍国医国药，２００５， １６（２）：１６６． ［２］ 孙军．止消通脉宁治疗早期糖尿病肾病的临床研究［Ｊ］．北京中 医．１９９９，４：５０ ［３］ 昌仁和．糖尿病及其并发症中西医治疗学［Ｍ］．北京：人民卫生出 版社，１９９８：１４７． ［４］ 赵进喜，牟新，王世东，等．止消通脉宁颗粒治疗糖尿病肾病肾功 能不全代偿期３３例疗效观察［Ｊ ．河南中医，２００４，２４（８）：２０． 『５］ 郭啸华，刘志红，李恒，等．实验性２型糖尿病大鼠模型的建立 图３ 卡托普利组肾单位 图４低剂量组肾单位 ［Ｊ］肾脏病与透析移植杂志，２０００，９：３５１． 超微结构图（７０００×） 超微结构图（７０００ ｘ） ｆ ６］畅新燕，白辉辉，郑栓，等．糖尿病肾病中医药治疗研究述评 ４讨论 ［Ｊ］．光明中医，２００８，２３（１３）：２０５３． 糖尿病属中医“消渴病”范畴，糖尿病肾病则为消渴病继发 ｆ ７］王青．王征，郑清明，等．止消保肾宁颗粒的毒理学研究［Ｊ］． 病证，中医学将其归属于消渴病继发“水肿…‘尿浊”“关格… 肾 药学服务与研究，２００７，７（４）：２９８ ・ｌ ｌ２９・